入世纪末叶，京城之内出现了一群武艺高强且极富正义感的侠客，专门惩治武林败类，义除赃官，抚弱济贫，人称“京城镖局”，为首的就是闻名遐尔的大刀王五，他们不仅除恶扬善还投身救国。戊戌变法失败后，兄弟们齐心协办，深入牢营解救谭嗣同出狱，但谭嗣同仍以忠君为本，谢绝了镖局兄弟一片侠情义胆，慨然就义，王五等人只好洒泪告别。随后他们又开始了暗杀窃国大盗袁世凯的计划……
1940年，山西问水村民兵队队长窦三喜召集邻村的民兵骨干开会，商讨如何端掉伪军据点薛山寨事宜，但因奸细出卖，所有人壮烈牺牲，缺席会议的妇救会主任翠萍被人怀疑是奸细，为了证明自己的清白，翠萍利用自己的智慧联合了抗日义军首领岳五木拿下了据点，并在八路军连长罗青山的帮助下，不仅证明了自己的清白，还挖出了奸细。随后，罗青山带领翠萍等人重建队伍，发动民众填死水井、炸毁碾磨，巧夺战略物资，配合大部队对铁路线路轨、车站等进行破坏活动，与日军指挥官上衫勇频频对抗，气急败坏的上衫勇发动大规模围剿计划，身边战友们一个个牺牲，翠萍也从一个当初妇救会干事成长为一名合格的八路军战士，最终粉碎了上衫勇一系列的围剿计划，策应大部队反围剿运动。一个月后，翠萍奔赴天津，她带着战友的遗志和爱，投入到了新的战斗任务中。
与国内目前常见的公安题材影视剧不同的是，《探长欧光慈》是眼下非常少见的悬疑、推理侦探剧。全剧通过《红樱桃之谜》、《电梯谋杀案》、《新娘之死》等10个独立成章的侦破案组成，通过起伏跌宕、疑云重重的情节设置，表现了探长欧光慈和他的伙伴利用独到而严谨的逻辑分析，从细节入手，抽丝剥茧揭开谜团的过程，塑造了睿智而又细心的全新公安人员形象。随着剧情的深入，观众会不知不觉被编导带入一个精心设计的迷宫，而剧中所写案件都是发生在我们生活的中间，观众可以运用自己的经验和推理判断能力与剧中人来一番智力的大比拼，犹如进行一次惊险刺激而又妙趣横生的智力旅行。
